Wikipedista:Yennefer1/Poliovirus

Poliovirus
Struktura virové kapsidy. Barevně odlišené postranní řetězce proteinů.
Baltimorova klasifikace virů
Skupina	IV. (ssRNA viry s kladnou polaritou)
Vědecká klasifikace
Realm	Riboviria
Říše	Orthornavirae
Kmen	Pisuviricota
Třída	Pisoniviricetes
Řád	Picornavirales
Čeleď	Picornaviridae
Rod	Enterovirus
Druh	Enterovirus C
Poddruh	Poliovirus

Poliovirus (virus poliomyelitidy, PV) je neobalený RNA virus způsobující infekční onemocnění dětskou obrnu. Řadí se mezi lidské enteroviry C v rámci rodiny picornavirů. Jsou známé 3 serotypy poliovirů: PV1, PV2 a PV3. Hostitelem mohou být primáti nebo člověk. Vlivem očkování došlo téměř k jeho vymýcení.

Historie

Za nejstarší zobrazení člověk s následky poliomyelitidy se považuje staroegyptský stéla, na které má pokřivenou a hypotrofickou nohu po prodělaném hořečnatém onemocnění. Ve spisech Hippokrata je taktéž možné najít záznamy o nemoci vyskytující se v letních měsících a způsobující obrny končetin.

V roce 1838 německý lékař Jakob von Heine popsal poprvé klinické projevy dětské obrny. O více než 50 let později švédský dětský lékař Karl Oskar Medin zjistil, že onemocnění se může přenášet mezi lidmi a o dalších 20 let později Karl Landsteiner popsal virus dětské obrny. První inaktivovaná vakcína byla připravena v roce 1954 Jonasem E. Salkem.

Stavba

Virion je tvořen, stejně jako další picornaviry např. rhinoviry, neobalenou kapsidou, která má ikosahedrální tvar s vnějším průměrem asi 300 Å. Každá kapsida obsahuje 60 kopií tří povrchových virových proteinů: VP1, VP2 a VP3, a také 60 kopií interně umístěného VP4. Tři povrchové proteiny zaujímají strukturu antiparalelního β-barelu. Tento motiv je poměrně běžný pro kapsidy dalších virů. Povrch kapsidy má vlnitou topografii: prominentní vrchol ve tvaru hvězdy je obklopený hlubokou prohlubní a dalšími výčnělky. Tato struktura vytváří takové žlábky pro navázání na poliovirový receptor, jehož rozpoznání je klíčové pro vstup virové genetické informace do hostitelské buňky.

Genomová struktura polioviru typu I. Poliovirový genom se skládá z jednovláknové molekuly RNA s pozitivní polaritou, která kóduje jeden polyprotein. 5´ nekódující oblast (NTR - non-translated region) obsahuje dvě funkční domény: vlásenkovou strukturu čtyřlístku a vnitřní místo vstupu ribozomu (IRES). Na 5´konci je vlákno kovalentně spojeno s virovým proteinem VPg a na 3´konci je polyadenylováno.

Genetická informace je nesena jednovláknovou RNA s pozitivní polaritou ((+)ssRNA), která se skládá přibližně z 7 500 bází. Genomová RNA je na 3´konci adenylována, čímž je zajištěna její stabilita, a na 5´konci kovalentně navázána na virový protein spojený s genomem (VPg-viral protein genome-linked) protein. Pro vytvoření nových částic virus využívá hostitelský ribosomální aparát, tudíž virová translace může probíhat bez potřeby virových proteinů. Studie sekvencí RNA prokázaly, že všechny poliovirové polypeptidy se tvoří z jedné prekurzorové molekuly nekapsidálního virálního proteinu. Na 5´konci se dále nachází netranslatovaná oblast obsahující sekvenci, rozpoznávající ribosomem, vnitřní místo pro vstup ribosomu (IRES). Mutace v rámci sekvence IRES u atenuovaných kmenů můžou způsobit problémy při translaci či ji kompletně znemožnit.

Klasifikace

Virus lze s využitím Baltimorovy klasifikace zařadit do skupiny 4, tedy do skupiny virů s jednovláknovým RNA genomem s kladnou polaritou. Genomová RNA může rovnou sloužit jako messengerová RNA, je tedy sama o sobě infekční a může se množit s využitím hostitelského aparátu. Do této skupiny dále patří např. Picornaviridae (polioviry, rhinoviry), virus hepatitidy A, Flavivirus, Togavirus, Koronavirus.

Životní cyklus

Vstup do buňky

Buněčný životní cyklus polioviru. Je iniciováno vazbou viru na makromolekulu buněčného povrchu CD155 fungující jako receptor (1). Uvolnění virové RNA je zprostředkováno destabilizací kapsidy (2). Štěpení virového proteinu VPg se provádí buněčnou fosfodiesterázou a k translaci virové RNA dochází mechanismem nezávislým na 5´čepičce (zprostředkováno IRES) (3). Proteolytické zpracování virového polyproteinu poskytuje zralé strukturní a nestrukturální proteiny (4). RNA s pozitivní polaritou slouží jako templát pro syntézu komplementárních vláken s negativní polaritou, čímž vzniká dsRNA (5). Vznik mnoha (+) řetězců z jednoho (-) řetězce produkuje jednovláknový replikativní meziprodukt (RI) (6). Nově syntetizované molekuly (+)ssRNA mohou sloužit jako templáty pro translaci (7) nebo pro asociaci s prekurzory kapsidů, aby podstoupily enkapsidaci a indukovaly štěpení prekurzorového kapsidového proteinu VP0 (8), což nakonec generuje vznik nových virionů. Lýze infikovaných buněk vede k uvolnění virových partikulí (9).

Virus vstupuje do organismu orální cestou, tedy hostitelské jsou buňky gastrointestinálního traktu. Je schopen napadnout buňky tenkého střeva, což mu umožňuje jeho zvýšená odolnost vůči nízkému pH nacházející se v žaludku.

Infekce poliovirem je zahájena rozpoznáním povrchových buněčných receptorů Pvr (CD155). Pro infekci cílové buňky dochází k navázání na hostitelský membránový protein, který se podílí především na tvorbě adherentních spojů mezi sousedícími epiteliálními buňkami. Tyto proteiny také slouží jako receptory pro herpesviry. U těchto virů receptor ještě iniciuje konformační změny v kapsidě, které pomáhají rozbalit proteiny kapsidy a umožnit uvolnit genomovou informaci. Dochází tedy ke konformační změně kapsidy, kdy je jeden kapsidový protein viru vsunut do buněčné membrány, utvoří pór skrz nějž je následně vpraven virový genom do cytoplasmy.

Translace

Po vstupu genomu do buňky dochází k translaci virových proteinů hostitelským ribozomálním aparátem, což je umožněno díky přítomnosti IRES sekvence, která slouží jako náhrada pro strukturu eukaryotické 5´čepičky (CAP) , kterou běžně hostitel rozpoznává. Následně dochází k translaci jednoho celistvého polyproteinu přibližné délky 3000 aminokyselin. Polyprotein je následně štěpen pomocí proteáz na jednotlivé funkční proteiny.

V pozdější fázi infekce buňky dochází virem k omezení exprese hostitelských genů a zabránění buněčné antivirové obrany. To může být docíleno štěpením eukaryotických iniciačních faktorů (eIF), které jsou běžně esenciální pro zahájení translace mRNA, a nebo poškozením funkčnosti jaderných pórů. Virus také obsahuje enzymy schopně inaktivovat proteiny vázající CAP strukturu, což má za následek sníženou kompetici mezi virovou a hostitelskou RNA a dojde k preferování translace RNA obsahující virovou IRES sekvenci.

Replikace a transkripce

Virová RNA má na 5´konci vlákna kovalentně navázaný protein VPg, který slouží jako primer pro zahájení transkripce. Dále obsahuje replikační element, který vytváří smyčku sloužící pro vazbu příslušných proteinů potřebných pro replikaci.

Při replikaci dochází k vytvoření dvouvláknové RNA, kterou buňka registruje jako důkaz o virové infekci. Aby se zabránilo buněčné imunitní odpovědi, probíhá replikace i transkripce na buněčných membránách organel (endoplasmatického retikula). Virus využívá totiž hostitelského vezikulárního transportu k pučení váčků, ve kterých je zajištěno ideální prostředí pro replikaci RNA. U vzniklého dsRNA intermediátu následně negativní vlákno slouží jako templát pro tvorbu nové genomické ssRNA. Tvorba genomických RNA může probíhat několikanásobně na jednom vlákně (-)ssRNA.

Enkapsidace a opuštění buňky

Po rozštěpení polyproteinu na jednotlivé segmenty se vytvoří struktura kapsidy. Balení RNA do vznikajících kapsid je přímo spojeno s RNA replikací, čímž je zajištěno selekce pouze (+)ssRNA. Ven se virová částice dostává nejčastěji lytickou cestou pomocí pórů, může ale nastat i exocytóza virionů pomocí buněčných veziklů. Z napadených GIT buněk se tak virus může dostat do krevního řečiště, následně infikovat buňky CNS a způsobit paralýzu, nebo se zpět uvolní do stolice, opustí hostitele a dochází k jemu dalšímu šíření.

Muž po dětské obrně.

Onemocnění

Je to vysoce nakažlivé onemocnění přenášející se kapénkovou infekcí. Projevuje se horečnou, zánětem spojivek a drobnou vyrážkou, může docházet k zápalům plic nebo zánětům středního ucha. Ve většině případů probíhá subklinicky bez zjevných známek infekce, ale ve vzácných případech může dojít až k postižení centrálního nervového systému.

Vzácná neurologická komplikace virové infekce se nazývá lidská paralytická poliomyelitida a projevuje se u méně než 1 % infikovaných jedinců. Je charakterizována svalovou slabostí nebo paralýzou v důsledku následnou destrukcí inervačních spinálních motorických nervů. Postižení horní krční a prodloužené míchy má pak za následek obrnu dýchacích svalů. Patologie onemocnění lidské poliomyelitidy byla experimentálně pozorována také u infikovaných šimpanzů a dalších opic.

Léčba dětské obrny je reálně symptomatická. Při obrně postihující dýchací svaly poskytl pomoc ventilátor zvaný železné plíce. Využívajíc negativní tlak působící na hrudní stěnu významně přispěl ke zlepšení prognózy pacientů.

Vakcíny proti dětské obrně

Kvůli narůstající nemocnosti a obavám z epidemie se na jaře 1957 v Československu uskutečnilo masové očkování dětí třemi dávkami inaktivované vakcíny, kdy došlo k proočkování až 94% dětí mladších patnácti let. Od 2. poloviny roku 1960 se na území Československa nevyskytl žádný případ nezavlečené paralytické poliomyelitidy. Tím jsme se stali první zemí na světě, kde byla nemoc dětské obrny vymýcena. Nyní se v České republice se proti dětské obrně očkuje v rámci kombinované hexavakcíny a následné přeočkování monovakcínou v celkem pěti dávkách. Očkování se provádí inaktivovanou očkovací látkou.

Antivirotika

Potenciál antivirotik je důležitý hlavně v případech, že u lidí trpících imunodeficiencí může dojít k propuknutí infekce a znepokojujícím rizikem se jeví i fakt, že virové partikuly mohou uvolňovat do okolí i několik let po primární infekci. Ve Spojených státech amerických je vakcinace proti dětské obrně spojena se 4 až 5 případy paralytické obrny ročně. V rozvojových zemích zůstává obrna i přes snahy o vymýcení vážnou hrozbou. U dlouhé chronické nákazy se zvyšuje také riziko mutací, na který by nemuselo fungovat očkování. Ukázalo se, že žádná léčba zatím není účinná při léčbě infekcí centrálního nervového systému poliovirem. V roce 2006 došlo ke zformování Poliovirové Antivirální Inciativy (PAI), která má za úkol vytvořit alespoň dva druhy antivirotik s odlišným mechanismem účinku.

Pleconaril je nové antivirové činidlo, které vykazuje aktivitu proti širokému spektru enterovirů. Hlavní mechanismus účinku tohoto antivirotika spočívá v inhibici proteinů související s navázáním viru na hostitelskou buňku.

Dalším slibným antivirotikem se jeví pocapavir, který byl objeven v roce 1996. Pocapavir je studovaný lék, který působí jako inhibitor zabraňující virionu vstoupit do buňky. Vykazuje taktéž aktivitu proti enterovirům, které nejsou spojeny s obrnou, a mohou být užitečné při léčbě závažných enterovirových infekcí. Ve studiích z roku 2017 se jeví být velmi účinný vůči poliovirům, při zvládání infekce během eradikace.